HL-60人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)
生長特性:懸浮
培養(yǎng)條件:1640+10%FBS+1%P/S
細(xì)胞簡介:
HL-60細(xì)胞是源自一位患有急性粒-單核細(xì)胞白血病的36歲白人女性的早幼粒細(xì)胞系。HL-60細(xì)胞自發(fā)分化,丁酸鹽、次黃嘌呤、佛波醇、肉豆蔻酸、DMSO(1%-1.5%)、放線菌素D和視黃酸均可以促進(jìn)分化。HL-60細(xì)胞表現(xiàn)出吞噬活性,并對(duì)趨化刺激有響應(yīng);HL-60細(xì)胞致癌基因myc表達(dá)陽性。該細(xì)胞系可用于免疫紊亂和免疫學(xué)研究。
注意事項(xiàng):
1. HL-60細(xì)胞懸浮圓形生長,偶有小聚團(tuán),屬于正?,F(xiàn)象,無需吹散;
2. 少量細(xì)胞附著瓶底屬于正常現(xiàn)象,可將懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)移至新瓶,丟棄貼壁的細(xì)胞;
3. 圓形透亮、細(xì)胞膜完整的細(xì)胞是活細(xì)胞,如果無法判斷,可以取少量細(xì)胞用臺(tái)盼藍(lán)染色后計(jì)數(shù)確定細(xì)胞活率;
4. 接種密度建議在10萬-50萬細(xì)胞/mL之間為宜,密度過低或過高都可能造成細(xì)胞狀態(tài)變差;
5. 復(fù)蘇時(shí)需盡快離心去除DMSO,避免DMSO刺激HL-60細(xì)胞發(fā)生分化;
6. HL-60細(xì)胞生長需要穩(wěn)定的環(huán)境,不頻繁拿出培養(yǎng)箱,不頻繁離心;
7. 當(dāng)細(xì)胞狀態(tài)較差時(shí),不建議對(duì)細(xì)胞進(jìn)行離心,需換液時(shí)可采用半換液法。
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